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蛋白共提取开云体育投注规则厂家中了解细胞总蛋白提取的方法
发布日期:
2017-03-13
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2314
蛋白共提取开云体育投注规则适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取线粒体蛋白。提取过程简单方便。制备的线粒体蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。蛋白共提取开云体育投注规则厂家介绍细胞总蛋白提取的方法。
1. 裂解液制备:每500ul冷的Buffer I中加进2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 在4℃,1000rpm条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加进500ul冷的裂解液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸进另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。